گزارشکار آز جداسازی


جلسه ششم/2:شناسایی آمینواسیدها,استرها وفنول ها

Amino acid

From Wikipedia, the free encyclopedia
Jump to: navigation, search
The generic structure of an alpha amino acid in its unionized form
Table of Amino Acids.
The 21 amino acids found in eukaryotes, grouped according to their side-chains' pKas and charge at physiological pH 7.4

Amino acids (play /əˈmn/, /əˈmn/, or /ˈæmɪn/) are molecules containing an amine group, a carboxylic acid group, and a side-chain that is specific to each amino acid. The key elements of an amino acid are carbon, hydrogen, oxygen, and nitrogen. They are particularly important in biochemistry, where the term usually refers to alpha-amino acids.

تست نین هیدرین

آزمایش نین هیدرین :

در این آزمایش ترکیبی به نام نین هیدرین با آمینواسید وارد واکنش می شود. در صورت برخورد و مجاورت این دو با یکدیگر ،گروه آمینی و کربوکسیل آمینواسید آزاد می شود . و خود آمینواسید به شکل به شکل یک ترکیب آلدهید CHO_R در می آید. و خود نین هیدرین به ماده ای به نام هیدرین دانتین  تبدیل می شود.

این واکنش برای هر اسیدآمینه ای پیش می رود. اما در اسیدآمینه پرولین تا حدی پیش می رود زیرا گروه متیل موجود در پرولین مانع از کامل شدن آزمایش می شود. به همین دلیل پرولین رنگ زرد ایجاد می کند.

یعنی  به طور خلاصه داریم :

نین هیدرین+ همه امینواسید ها= کمپلکس ارغوانی

پرولین + نین هیدرین زرد

روش کار:

۱-2 سی سی محلول اسید آمینه + چند قطره محلول نین هیدرین  5 ذقیقه در بن ماری جوش

با آب مقطر نیز Blank می گذاریم.

همه آمینواسیدها جواب مثبت می دهند ارغوانی

پرولین  زرد

آب مقطر    بی رنگ



Add about 2 mg of the sample to 1 mL of a solution of 0.2 g of ninhydrin (1,2,3indanetrione monohydrate) in 50 mL of water. The test mixture is heated to boiling for 15-20 sec; This reaction is important not only because it is a qualitative test, but also because it is the source of the absorbing material that can be measured quantitatively by an automatic amino acid analyzer. This color reaction is also used to detect the presence and position of amino acids after paper chromatographic separation.

Positive Test

A blue to blue-violet color is given by a-amino acids and constitutes a positive test. Other colors (yellow, orange, red) are negative.


Proline, hydroxyproline, and 2-, 3-, and 4-aminobenzoic acids fail to give a blue color but produce a yellow color instead.

Ammonium salts give a positive test. Some amines, such as aniline, yield orange to red colors, which is a negative test

physical propertis of nin hydrin

 Physical State: Crystalline powder
Appearance: slightly yellow
Odor: characteristic odor
pH: Not available.
Vapor Pressure: Negligible.
Vapor Density: 6.16 (air=1)
Evaporation Rate:Not applicable.
Viscosity: Not available.
Boiling Point: Not available.
Freezing/Melting Point:466 deg F (dec)
Autoignition Temperature: Not applicable.
Flash Point: Not applicable.
Decomposition Temperature:466 deg F
NFPA Rating: (estimated) Health: 2; Flammability: 1; Reactivity: 0
Explosion Limits, Lower:Not available.
Upper: Not available.
Solubility: Soluble in water.
Specific Gravity/Density:0.86
Molecular Formula:C9H6O4
Molecular Weight:178.14

شناسایی استرها: 


From Wikipedia, the free encyclopedia
Jump to: navigation, search
A carboxylic acid ester. R and R' denote any alkyl or aryl group

Esters are chemical compounds derived by reacting an oxoacid with a hydroxyl compound such as an alcohol or phenol.[1] Esters are usually derived from an inorganic acid or organic acid in which at least one -OH (hydroxyl) group is replaced by an -O-alkyl (alkoxy) group, and most commonly from carboxylic acids and alcohols. That is, esters are formed by condensing an acid with an alcohol.

Esters are ubiquitous. Most naturally occurring fats and oils are the fatty acid esters of glycerol. Esters with low molecular weight are commonly used as fragrances and found in essential oils and pheromones. Phosphoesters form the backbone of DNA molecules. Nitrate esters, such as nitroglycerin, are known for their explosive properties, while polyesters are important plastics, with monomers linked by ester moieties.




Preparation of Esters

Hydroxamic Acid Test


Determination of esters in dry and sweet white wines by headspace solid-phase microextraction and gas chromatography

:واکنش های تهیه استر

۱. Favorskii Reaction:

Ring - conntraction.۲:


۳-passerini Reaction:


اگر به جای اتم هیدروژن گروه کربکسیل یک گروه الکیل قرار بگیرد ترکیبی به نام استر به دست می‌‎آید. استرها از مهم‌ترین مشتقات کربکسیلیک اسید‌هاهستند. طعم و بوی شاخص اغلب میوه‌ها و گل‌ها به علت وجود این استرهاست. استر از واکنش کربکسیلیک اسید با الکل بدست میاید. اتيل استات يك استر است كه از واكنش بين اتانول كه يك الكل است با استيك اسيد كه يك اسيد است، به دست مي آيد.


درواقع گروه عاملي استر به صورت –O-C=O است كه هم اكسيژن سمت چپ و هم كربن گروه C=O خود به هيدروكربن هاي ديگر متصل مي باشند. استرهاي حلقه‌اي نيز كه لاكتون ناميده مي‌شوند، جزو گروه استرها مي‌باشند.

خواص استر:

استرها غالبا فرار و معطرند و برخي از آنها در ميوه‌هاي رسيده يافت مي‌شوند. مثلا استات ايزوپنتيل ، بوي موز ميدهد والرات ايزوپنتيل بوي سيب و پروپيونات ايزوبوتيل ، بوي نيشكر ميدهند.

موارد استفاده از استر:

خيلي از استرها مانند استات اتيل و استات بوتيل ، بعنوان واكنش‌گر و يا حلال و نرم كننده رزينها در آزمايشگاهها و صنعت مورد استفاده قرار مي‌گيرند.

 روش تهيه استرها و لاكتونها:

اولين و قديمي‌ترين روش سنتز استرها ، واكنش اسيدهاي آلي با الكلها در حضور اسيد معدني(معمولا اسيد سولفوريك) مي‌باشد. با اين روش ، مي‌توان خيلي از استرها را بطور مستقيم سنتز نمود كه اين روش ، روش فيشر (Fisher) ناميده مي‌شود. در مواقعي كه اسيد يا الكل بكار رفته ، ارزان قيمت باشد، مي‌توان مقدار يكي از واكنشگرها را چند برابر دومي انتخاب كرد و تعادل را به نفع تشكيل محصول بيشتر جابجا كرد و استر بيشتري بدست آورد.







تست های شناسایی فنول ها


From Wikipedia, the free encyclopedia
Jump to: navigation, search
CAS number 108-95-2 YesY
PubChem 996
ChemSpider 971 YesY
DrugBank DB03255
KEGG D06536 YesY
ChEBI CHEBI:15882 YesY
RTECS number SJ3325000
ATC code C05BB05,D08AE03, N01BX03, R02AA19
Jmol-3D images Image 1
Molecular formula C6H6O
Molar mass 94.11 g mol−1
Appearance transparent crystalline solid
Density 1.07 g/cm3
Melting point

40.5 °C, 314 K, 105 °F

Boiling point

181.7 °C, 455 K, 359 °F

Solubility in water 8.3 g/100 mL (20 °C)
Acidity (pKa) 9.95 (in water),

29.1 (in acetonitrile)[2]

λmax 270.75 nm[1]
Dipole moment 1.7 D
GHS pictograms GHS-pictogram-acid.svgGHS-pictogram-skull.svgGHS-pictogram-silhouete.svg[3]
GHS hazard statements H301, H311, H314, H331, H341, H373[3]
GHS precautionary statements P261, P280, P301+310, P305+351+338, P310[3]
EU classification Toxic (T)
Muta. Cat. 3
Corrosive (C)
R-phrases R23/R24/R25-R34-R48/R20/R21/R22-R68
S-phrases (S1/2)-S24/S25-S26-S28-S36/S37/S39-S45
NFPA 704
NFPA 704.svg
Flash point 79 °C
Related compounds
Related compounds Benzenethiol
 YesY (verify) (what is: YesY/N?)
Except where noted otherwise, data are given for materials in their standard state (at 25 °C, 100 kPa)
Infobox references

Phenol, also known as carbolic acid and phenic acid, is an organic compound with the chemical formula C6H5OH. It is a white crystalline solid at room temperature. The molecule consists of a phenyl group (-C6H5) bonded to a hydroxyl group (-OH). It is mildly acidic, but requires careful handling due to its propensity to cause burns.

Phenol was first extracted from coal tar, but today is produced on an large scale (about 7 billion kg/year) using industrial processes. It is an important industrial commodity as a precursor to many materials and useful compounds.[4] Its major uses involve its conversion to plastics or related materials. Phenol and its chemical derivatives are key for building polycarbonates, epoxies, Bakelite, nylon, detergents and a large collection of drugs and herbicides.


فنول به صورت بلورهای جامد و بی‌رنگ با بوی تند و مخصوص است. فنول ، ماده‌ای سمی وخطرناک است و نباید دست و صورت با آن تماس پیدا کند، زیرا تولید زخم های خطرناک می‌نماید. از این جهت در آزمایشگاه باید از دستکش و عینک هنگام کار با این ماده استفاده کرد.

فنولها ترکيبات اسيدي هستند که قدرت اسيدي آنها از کربوکسيليک اسيدها کمتر است اين امر در مورد فنولهايي که داراي استخلافهاي نيترو هستند صدق نمي کند.

1- محلول سديم هيدروکسيد
انحلال پذيري فنولها در محلول سيدم هيدروکسيد، در مورد فنولهايي که امکان مزدوج شدگي در باز مزدوج ( آنيون فنولات ) آنها زياد است، با رنگي شدن محلول همراه است. براي مشاهده رنگ، بايد مقدار کمي از فنول را در محلول سديم هيدروکسيد 10 درصد حل نمود. انحلال بعضي فنولها با رنگي شدن همراه نيست. و تعدادي از آنها نيز در محلول سديم هيدروکسيد نامحلول هستند و بصورت رسوب مي باشند.

2- فريک کلريد
فنولهاي محلول در آب
چند قطره محلول آبي فريک کلريد 5/2 درصد به يک ميلي ليتر محلول آبي و رقيق فنول ( حدود 3- 1 درصد وزني ) اضافه نماييد. در مورد بيشتر فنولها رنگ قرمز تند، آبي، ارغواني يا سبز ظاهر مي شد. بعضي رنگها بصورت گذرا هستند و براي مشاهده رنگ بايد محلول خوب همزده شود و مخلوط گرد رنگي شدن معمولا فوري است. اما بايد توجه داشت که رنگ محلول براي زمان زيادي پايدار نيست.

فنولهاي نامحلول در آب
 بسياري از فنولها با روشي که پيش از اين ذکر شد و به آزمايش فريک کلريد پاسخ مثبت نمي دهند و بايد آزمايش را بدين ترتيب انجام داد که 20 ميلي گرم از فنول جامد يا يک قطره فنول مايع را در يک ميلي ليتر کلروفرم حل يا به حالت تعليق درآورد و سپس يک قطره پيريدين و سه تا پنج قطره از محلول 1 درصد فريک کلريد ( حجم/ وزن ) در کلروفرم به آن اضافه نماييد.


نکته:این ازمایش زیر هود انجام شود.


Ferric chloride - pyridine test for phenols.


In hood: Add 4 or 5 drops or 30 - 50 mg of unknown to 2 mL of pure chloroform in a clean, dry test tube. Stir the solution. If the unknown does not dissolve, even partially, add 2 - 3 mL more chloroform and warm gently. Cool to 25oC and add 2 drops of 1% solution of anhydrous ferric chloride in chlorofrom followed by 3 drops of pyridine. Shake the test tube and note the color produced immediately.

Positive Test

The appearance of blue, violet, purple, green, or red-brown color is a positive test.


Not all phenols or enols give positive results.

Most oximes, hydroxamic acids, and sulfinic acids give a positive test.


3- برم / آب
محلول آبي 1 درصد از مجهول تهيه نماييد سپس به آن قطره قطره محلول آب برم اشباع شده اضافه نماييد و هر بار تکان دهيد تا رنگ زايل شود. تشکيل رسوب به دليل توليد محصول استخلاف شده است که همزمان با از بين رفتن رنگ برم است به عنوان نتيجه مثبت براي اين آزمايش تلقي مي شود.



+ نوشته شده در  شنبه شانزدهم اردیبهشت ۱۳۹۱ساعت 14:47  توسط رحمانی - رجبعلی  |